ABSTRACT
Objetivo: O intuito deste estudo é avaliar a adesão de um cimento endodôntico (AH Plus) em canais radiculares após o uso de diferentes protocolos de EDTA 17% e o uso de medicação intracanal (ICM) à base de hidróxido de cálcio em veículo aquoso. Material e Métodos: Para isso, 72 dentes humanos unirradiculares foram instrumentadas até # 50 e divididos em seis grupos (n = 12). Grupo 1: EDTA por 3 min; Grupo 2: 3 mL de EDTA + 3 min de EDTA; Grupo 3: 3 ml de EDTA + 3 min de EDTA + 30 segundos de agitação ultra-sônica; Grupo 4: EDTA durante 3 min + ICM; Grupo 5: 3 ml de EDTA + 3 min de EDTA + ICM; Grupo 6: 3 ml de EDTA + 3 min de EDTA + 30 segundos de agitaçãosônica + ICM. Os canais radiculares foram preenchidos com cimento endodôntico após cada protocolo e, após 7 dias foram preparados para o teste de push-out. Os dados foram analisados utilizando ANOVA dois fatores (p < 0,05). Resultados: Não foi observado diferença estatística na resistência de união nos 3 diferentes protocolos de EDTA a 17%. No entanto, o uso de ICM aumentou significativamente a resistência de adesão. Conclusão: a medicação intracanal à base de hidróxido de cálcio melhorou a resistência de união do AH Plus às paredes dentinárias, independentemente do protocolo de EDTA. (AU)
Objective: The aim of this study is to evaluate the adhesion of an endodontic sealer (AHPlus) in root canals after the use of different protocols of 17% EDTA and the use of intracanal medication (ICM) based on calcium hydroxide in aqueous vehicle. Material and Methods: For this, 72 single-rooted human teeth were instrumented up to #50 and divided into six groups (n = 12). Group 1: EDTA for 3 min; Group 2: 3 mL of EDTA + 3 min of EDTA; Group 3: 3 mL of EDTA + 3 min of EDTA + 30 seconds of ultrasonic agitation; Group 4: EDTA for 3 min + ICM; Group 5: 3 mL of EDTA + 3 min of EDTA + ICM; Group 6: 3 mL of EDTA + 3 min of EDTA + 30 seconds of ultrasonic agitation + ICM. The root canals were filled with endodontic sealer after each protocol and after 7 days they were prepared to the push-out test. The data were analyzed using twoway ANOVA (p< 0.05). Results: It was observed no statistically difference in bond strength in the 3 different 17% EDTA protocols. However, the use of ICM increased significantly the resistance adhesion. Conclusion: Intracanal medication based on calcium hydroxide improved the bond strength of AHPlus to dentin walls, regardless of the EDTA protocol. (AU)
Subject(s)
Humans , Calcium Hydroxide , Dentin , Edetic AcidABSTRACT
O objetivo deste estudo foi avaliar a função da via de sinalização Wnt/β-catenina através dos receptores LRP6 e Frizzled6 na diferenciação de células-tronco de polpa dental de dentes permanentes (DPSC) em células endoteliais. DPSC foram transduzidas com marcadores eGFP e vetores lentivirais shRNA (LRP6, Frizzled6 ou vetor vazio - controle) para os experimentos. Os testes in vitro avaliaram a expressão de GSK3-β e β-catenina por western blot na presença de rhWnt1 e rhVEGF165 e de VEGFe CXCL-8 (IL-8) por ELISA. A expressão de marcadores endoteliais (western blot e PCR) e formação de túbulos capilares foram analisados após a diferenciação endotelial das DPSCs. In vivo, fatias dentárias/matrizes condutivas semeadas com DPSCs-shRNA foram implantadas em subcutâneo de dorso de camundongos imunodeprimidos por 28 dias e o número de vasos sanguíneos foi determinado por imunohistoquímica para eGFP e coloração por HE. β-catenina ativa foimais expressa em shRNA-LRP6 e shRNA-Frizzled6 que nas células controle, e sua expressão aumentou com a suplementação com rhVEGF165 e rhWnt1. A expressão de GSK3-β fosforilado foi menor, porém também aumenta ou permanece estável com rhVEGF165 ou rhWnt1. Quanto à expressão de VEGF, em shRNA-Frizzled6 foi maior que nas células controle e em shRNA-LRP6 (p<0,05), enquanto que a expressão de IL8 foi menor em shRNA-LRP6, diferindo estatisticamente das outras células. A expressão dos marcadores endoteliais CD31 eVEGFR2 diminuiu nas células shRNA-LRP6, enquanto que em shRNA Frizzled6a expressão de VEGFR2 foi aumentada. A formação de túbulos capilares de shRNA-Frizzled6 e shRNA-LRP6 foi menor quando comparado ao controle, porém shRNA-Frizzled6 obteve uma tendência de aumento na proliferação de capilares em 144h. In vivo, DPSC-shRNALRP6 apresentou menor número de capilares formados quando comparados com as outras duas células (p<0,05). Coletivamente, os resultados deste estudo sugerem que a via de sinalização Wnt/β-catenina regula a diferenciação...
The aim of this study was to evaluate the function of Wnt/β-cateninsignaling through LRP-6 and Frizzled-6 receptors in the differentiation ofdental pulp stem cells from permanent teeth (DPSC) into endothelial cells.DPSC were transduced with EGFP-tagged lentiviral shRNA vectors(LRP6, Frizzled6 or empty vector - control) for experiments. In vitro assayevaluated GSK3-β and β-catenin expression by western blot in rhWnt1and rhVEGF165 presence, and VEGF and CXCL-8 (IL-8) expression byELISA. Endothelial markers expression (western blot and PCR) and tubeformation were analyzed after endothelial differentiation of DPSCs. In vivo,tooth slices/scaffolds seeded with transduced DPSCs were implantedsubcutaneously in back of immunodefficient mice and blood vessels werecounted per immunohistochemistry for eGFP and HE staining. Active β-catenin was more expressed in shRNA-LRP6 and shRNA-Frizzled6 thanin control cells, and increased with rhVEGF165 and rhWnt1supplementation. Phosphorylated GSK3-β expression was lower, howeveralso increased or maintained with rhVEGF165 or rhWnt1. VEGF expressionwas higher in shRNA-Frizzled6 than in control and shRNA-LRP6 (p<0,05),IL8 expression was lower in shRNA-LRP6, with statistically difference ofthe others cells. Endothelial markers CD31 and VEGFR2 expressiondecreased in shRNA-LRP6, but VEGFR2 expression increased in shRNAFrizzled6.shRNA-Frizzled6 and shRNA-LRP6 tube formation was lowerwhen compared to control, however shRNA-Frizzled6 had tendency toincrease proliferation in 144h. In vivo, shRNA-LRP6 showed fewer bloodvessels formed than other cells (p<0,05). Collectively, the results of thisstudy suggest that Wnt/β-catenin signaling regulates endothelialdifferentiation of DPSC through LRP6.
Subject(s)
Blood Vessels , Neovascularization, Physiologic , Tissue Engineering , Wnt Signaling PathwayABSTRACT
O objetivo deste estudo foi avaliar a função da via de sinalização Wnt/β-catenina através dos receptores LRP6 e Frizzled6 na diferenciação de células-tronco de polpa dental de dentes permanentes (DPSC) em células endoteliais. DPSC foram transduzidas com marcadores eGFP e vetores lentivirais shRNA (LRP6, Frizzled6 ou vetor vazio - controle) para os experimentos. Os testes in vitro avaliaram a expressão de GSK3-β e β-catenina por western blot na presença de rhWnt1 e rhVEGF165 e de VEGFe CXCL-8 (IL-8) por ELISA. A expressão de marcadores endoteliais (western blot e PCR) e formação de túbulos capilares foram analisados após a diferenciação endotelial das DPSCs. In vivo, fatias dentárias/matrizes condutivas semeadas com DPSCs-shRNA foram implantadas em subcutâneo de dorso de camundongos imunodeprimidos por 28 dias e o número de vasos sanguíneos foi determinado por imunohistoquímica para eGFP e coloração por HE. β-catenina ativa foimais expressa em shRNA-LRP6 e shRNA-Frizzled6 que nas células controle, e sua expressão aumentou com a suplementação com rhVEGF165 e rhWnt1. A expressão de GSK3-β fosforilado foi menor, porém também aumenta ou permanece estável com rhVEGF165 ou rhWnt1. Quanto à expressão de VEGF, em shRNA-Frizzled6 foi maior que nas células controle e em shRNA-LRP6 (p<0,05), enquanto que a expressão de IL8 foi menor em shRNA-LRP6, diferindo estatisticamente das outras células. A expressão dos marcadores endoteliais CD31 eVEGFR2 diminuiu nas células shRNA-LRP6, enquanto que em shRNA Frizzled6a expressão de VEGFR2 foi aumentada. A formação de túbulos capilares de shRNA-Frizzled6 e shRNA-LRP6 foi menor quando comparado ao controle, porém shRNA-Frizzled6 obteve uma tendência de aumento na proliferação de capilares em 144h. In vivo, DPSC-shRNALRP6 apresentou menor número de capilares formados quando comparados com as outras duas células (p<0,05). Coletivamente, os resultados deste estudo sugerem que a via de sinalização Wnt/β-catenina regula a diferenciação ...
The aim of this study was to evaluate the function of Wnt/β-cateninsignaling through LRP-6 and Frizzled-6 receptors in the differentiation ofdental pulp stem cells from permanent teeth (DPSC) into endothelial cells.DPSC were transduced with EGFP-tagged lentiviral shRNA vectors(LRP6, Frizzled6 or empty vector - control) for experiments. In vitro assayevaluated GSK3-β and β-catenin expression by western blot in rhWnt1and rhVEGF165 presence, and VEGF and CXCL-8 (IL-8) expression byELISA. Endothelial markers expression (western blot and PCR) and tubeformation were analyzed after endothelial differentiation of DPSCs. In vivo,tooth slices/scaffolds seeded with transduced DPSCs were implantedsubcutaneously in back of immunodefficient mice and blood vessels werecounted per immunohistochemistry for eGFP and HE staining. Active β-catenin was more expressed in shRNA-LRP6 and shRNA-Frizzled6 thanin control cells, and increased with rhVEGF165 and rhWnt1supplementation. Phosphorylated GSK3-β expression was lower, howeveralso increased or maintained with rhVEGF165 or rhWnt1. VEGF expressionwas higher in shRNA-Frizzled6 than in control and shRNA-LRP6 (p<0,05),IL8 expression was lower in shRNA-LRP6, with statistically difference ofthe others cells. Endothelial markers CD31 and VEGFR2 expressiondecreased in shRNA-LRP6, but VEGFR2 expression increased in shRNAFrizzled6.shRNA-Frizzled6 and shRNA-LRP6 tube formation was lowerwhen compared to control, however shRNA-Frizzled6 had tendency toincrease proliferation in 144h. In vivo, shRNA-LRP6 showed fewer bloodvessels formed than other cells (p<0,05). Collectively, the results of thisstudy suggest that Wnt/β-catenin signaling regulates endothelialdifferentiation of DPSC through LRP6
Subject(s)
Blood Vessels , Neovascularization, Physiologic , Tissue Engineering , Wnt Signaling PathwayABSTRACT
Objective: To evaluate coronal bacterial leakage comparing five endodontic sealers (AH Plus, Apexit Plus, Copaifera sp oil, EndoREZ and Polifil), and comparing root canals filled with EndoREZ sealer/ EndoREZ® Points and EndoREZ sealer/conventional gutta-percha points. Material & Methods: 84 human teeth were prepared and filled with gutta-percha points using the single cone technique. Roots were randomly divided into 6 groups: Apexit Plus, AH Plus, Copaifera sp oil, Polifil, EndoREZ, and EndoREZ/EndoREZ Points. After setting time, the roots were incorporated in a leakage model, which upper chamber contained a suspension of Streptococcus mutans, and lower chamber a broth. Leakage was assessed for turbidity in lower chamber for 60 days. Statistic analysis was performed using the nonparametric Kaplan-Meier method (p<0.05). Results: All experimental groups presented leakage during the studys period. The medium time of leakage was: Apexit Plus and AH Plus 6.3 days, Polifil 5.1 days, Copaifera 1.2 days, and both EndoREZ groups infiltrated in the first day. Conclusions: There was no statistically significant difference between the sealers Apexit Plus, AH Plus and Polifil, but they prevented leakage better than Copaifera sp oil and both EndoREZ groups. However, none of the tested sealers was capable of resisting coronal bacterial leakage for more than 22 days.
Objetivo: Avaliar a infiltração coronária microbiana de cinco cimentos endodônticos (AH Plus, Apexit Plus, Copaiba, EndoREZ and Polifil), e comparar canais obturados com cimento EndoREZ/ cones EndoREZ e canais com cimento EndoREZ/ cones de guta-percha. Material e Métodos: 84 raízes de dentes humanos uniradiculados tiveram seus canais preparados e obturados pela técnica do cone único. As raízes foram divididas em 6 grupos: Apexit Plus, AH Plus, Copaiba, Polifil, EndoREZ e EndoREZ/ cones EndoREZ. Após endurecimento dos cimentos, as raízes foram adaptadas a um modelo de infiltração, cuja câmara superior continha uma suspensão de Streptococcus mutans, e a inferior um meio de cultura, deixando a porção apical da raiz imersa. A infiltração foi verificada diariamente pelo turvamento na câmara inferior, por um período de 60 dias. Os dados foram avaliados pela análise estatística não paramétrica Kaplan-Meier (p<0,05). Resultados: Todos os grupos experimentais apresentaram infiltração no período do experimento, contudo o tempo máximo foi de 22 dias. O tempo médio de infiltração foi: Apexit Plus 6,3 dias, AH Plus 6,3 dias, Polifil 5,1 dias, Copaiba 1,2 dias, e em ambos os grupos do cimento EndoREZ todos os espécimes infiltraram no primeiro dia. Conclusão: Não houve diferença estatisticamente significante entre os cimentos Apexit Plus, AH Plus e Polifil, mas estes apresentaram melhores resultados que Copaifera e ambos os grupos do EndoREZ. Porém, nenhum cimento foi capaz de impedir a infiltração coronária microbiana por mais de 22 dias.
Subject(s)
Dental Cements , Dental LeakageABSTRACT
Objective: To evaluate the apical leakage exhibited by root canals filled with gutta-percha points and three different endodontic sealers. Material and Methods: Thirty-five human molars were used and had their palatal (maxillary molars) and distal roots (mandibular molars) sectioned, standardized and instrumented with Mtwo rotary system. The roots were filled through active lateral condensation technique and divided into three groups (n=10), according to the endodontic sealer employed: G1- AH Plus, G2- Fill Canal, G3- MTA Fillapex. All groups were filled by gutta-percha points and endodontic sealer. Gutta-percha points were immersed into sodium hypochlorite for 24 h to achieve disinfection. After the filling procedure, the roots were immersed into Indian ink for posterior diaphanization and obtainment of the images through stereomicroscopy. By analyzing the images in Adobe Illustrator CS5 software, the level of apical leakage was determined. The data obtained were submitted to Kruskal Wallis and Dunn tests, with level of significance set at 5%. Results: Statistically significant differences were found between G1 and G3. G2 did not show statistically significant differences. G1 exhibited the smallest apical leakage mean (12.85), followed by G2 (109.84) and G3 (101.15). Conclusions: Root canal obturation with gutta-percha points and AH plus sealer through lateral condensation technique provided lower apical leakage rates than the other endodontic sealers evaluated
Objetivo: Avaliar a infiltração apical apresentada em canais radiculares obturados com guta-percha e três diferentes cimentos obturadores. Material e Métodos: Foram utilizados 35 molares humanos, os quais tiveram suas raízes linguais (molares superiores) e distais (molares inferiores) seccionadas, padronizadas e instrumentadas com o sistema rotatório Mtwo. As raízes foram obturadas através da técnica de condensação lateral ativa e divididas em 3 grupos (n=10), de acordo com o cimento obturador utilizado: G1- AH Plus, G2- Fill Canal, G3- MTA Fillapex. Todos os grupos foram obturados com o conjunto guta-percha e cimento obturador, sendo que a guta-percha utilizada permaneceu 24 h imersa em hipoclorito de sódio, para sua desinfecção. Após a obturação, as raízes foram imersas em corante tinta da Índia, para posterior diafanização e obtenção de imagens através de estereomicroscópio. Através da análise das imagens no programa Adobe Illustrator CS5 foi determinado o nível de infiltração apical. Os dados obtidos foram submetidos aos testes estatísticos de Kruskal Wallis e Dunn, com nível de significância 5%. Resultados: Verificou-se presença de diferença estatística significante entre o G1 e G3, sendo que G2 não diferiu estatisticamente dos demais grupos. O G1 apresentou a menor média de infiltração apical (12.85), seguida pelo G2 (109.84) e G3 (101.15). Conclusões: A obturação de canais radiculares com cones de guta-percha e cimento AH plus através da técnica de condensação lateral proporciona baixos índices de infiltração apical, quando comparada aos demais cimentos obturadores avaliados